準備室
準備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。洗滌室
洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,有時還會存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,應該設置洗滌室。室內(nèi)應備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設備及設施。
無菌室
無菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的優(yōu)點就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對接種工作干擾很大。
1.無菌室的設置
無菌室應根據(jù)既經(jīng)濟又科學的原則來設置。其基本要求有以下幾點:
①無菌室應有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應有天花板。
②內(nèi)間應當設拉門,以減少空氣的波動,門應設在離工作臺最遠的位置上;外間的門也用拉門,要設在距內(nèi)間最遠的位置上?! ?/span>
③在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應開一個小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對拉的窗扇。
④無菌室容積小而嚴密,使用一段時間后,室內(nèi)溫度很高,故應設置通氣窗。通氣窗應設在內(nèi)室進門處的頂棚上(即離工作臺最遠的位置),為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機?! ?/span>
2.無菌室內(nèi)設備和用具
①無菌室內(nèi)的工作臺,不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺面水平?! ?/span>
②在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央?! 、弁馐覒袑S玫墓ぷ鞣?、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
④內(nèi)室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等?! ?/span>
3.無菌室的滅菌消毒
①薰蒸:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時間,污染比較嚴重時,應進行薰蒸滅菌??捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。
②噴霧:在每次使用無菌室前進行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場,并有殺菌作用。可用5%石炭酸噴霧?! ?/span>
③紫外線照射:在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應開啟紫外線燈照射30~60min?! ?/span>
4.無菌室工作規(guī)程
①無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
②用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘?! ?/span>
③將各種需用物品搬進內(nèi)室清點、就位,用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進內(nèi)室工作。
④接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進行無菌操作時,動作要輕緩,盡量減少空氣波動和地面揚塵。
⑤工作中應注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時,浸潤5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
⑥工作結(jié)束,立即將臺面收拾干凈,將不應在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,對無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min。
恒溫培養(yǎng)箱
1.培養(yǎng)室的設置
①培養(yǎng)室應有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應有天花板。
②分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應設帶空氣過濾裝置的通風口。
③為滿足微生物對溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機。
④內(nèi)外室都應在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。
2. 培養(yǎng)室內(nèi)設備及用具
①內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(搖床)。常用的搖瓶機有旋轉(zhuǎn)式、往復式兩種。
②外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3.培養(yǎng)室的滅菌消毒
①同無菌室的滅菌、消毒措施。
②小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進行。
普通實普通實驗室室
進行微生物的觀察、計數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設因工作側(cè)重點不同而有很大的差異。一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑,實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等?! ?/span>
清潔區(qū)
包括辦公室、休息室、培養(yǎng)基配制室與試劑儲藏室。此區(qū)域禁止帶入細菌檢驗標本。
操作區(qū)
1.整潔:
微生物操作區(qū)是各種病原菌相對集中的地方,為了減少粉塵流動,防止交叉污染,操作區(qū)應與外界分開。實驗室工作人員進入操作區(qū)應換鞋,送標本人員不進入操作區(qū),操作區(qū)地面用專用拖把每天拖1次,每周用消毒劑擦洗1次。每天早上工作前,用紫外線照射30min,或每天工作后,用紫外線照射60min,對整個操作區(qū)進行消毒;下午工作結(jié)束后用消毒液消毒工作臺面,以保證工作環(huán)境的安全清潔。
2.光線:
細菌培養(yǎng)的細小菌落及血清試驗凝集顆粒的觀察,都需要有充足的光線。操作區(qū)除設置常規(guī)照明燈外,還必須安裝操作臺燈,以保證實驗結(jié)果的正確判斷。
3.通風:
由于各種病原菌集中,空氣污濁,實驗室要求保持良好的通風。
4.溫度和濕度:
由于無菌操作的要求,實驗過程中經(jīng)常使用酒精燈,因此,微生物學實驗室不能安裝吊扇。為了達到實驗所需的適宜溫度,尤其是滿足某些儀器對溫度濕度的要求,實驗室應安裝空調(diào)。
5.電源:
要求提供穩(wěn)壓、恒頻的電源;根據(jù)儀器設備要求,必要時配備不間斷電源。
6.水源:
操作區(qū)內(nèi)須設置水源。用于標本處理(如細菌染色)的水槽與工作人員洗手用的水槽不能混用。
7.污染物處理:
操作區(qū)須備有消毒缸,以處理沾有活菌的玻片等污染物品。檢驗剩余的標本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點安全放置,經(jīng)消毒滅菌處理后再洗滌或丟棄。
無菌區(qū)
1.無菌室應完全封閉,進出無菌室至少要經(jīng)兩道門,中間隔有緩沖間,無菌室與外間設置一個可開閉的窗口,用于傳遞器具。
2.無菌室必須保持整潔。工作人員進入無菌室應換專用鞋、專用衣。無菌室使用前須用紫外線消毒30min,操作結(jié)束后清潔臺面,再用紫外線消毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸,徹底消毒。
3.無菌室僅用于培養(yǎng)基分裝等無菌操作,不能進行有菌標本的操作。操作人員操作時應嚴格關(guān)門,并戴好專用的口罩、帽子。
4.無菌室內(nèi)應有空氣過濾裝置,并安裝空調(diào)。